目的 观察苏云金杆菌CryIVD转基因贮存藻对不同龄期淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法 大量培养工程藻,干燥后保存,应用不同时间的贮存藻作用于不同龄期淡色库蚊幼虫。结果 干燥贮存的工程藻数年后仍有较高的杀蚊毒效,尽管杀蚊毒效较新鲜工程藻有所下降,但在10⁵个/ml数量级不同龄期的幼虫仍有50%以上死亡。对不同龄期淡色库蚊幼虫杀灭效果比较表明,1～3年贮存藻3组比较,在10⁶个/ml数量级浓度的蚊幼虫死亡率差异无统计学意义(F=9.32, P>0.01),而贮存1年组和3年组在10⁵个/ml数量级浓度及以下,死亡率差异有统计学意义(F=101.21,P<0.01)。结论 转基因蓝藻在干燥贮存情况下仍能保持毒蛋白的稳定遗传和杀幼虫作用,为今后的现场应用提供更方便的选择。

家蝇酚氧化酶原系统是家蝇免疫体系重要的组成部分,在对病原识别和免疫防御中发挥着强有力的作用。目前,对该系统的关键基因和作用机制还不清楚。为此,进行了家蝇转录组分析,得到参与酚氧化酶原系统的酚氧化酶原、酚氧化酶原激活酶、Serpin型丝氨酸蛋白酶抑制因子及上游的模式识别受体等关键基因的EST(基因表达序列标签),现就它们的研究进展予以综述。

目的探讨冰冻储存对淡色库蚊非特异性酯酶(non-specific esterase,NSE)活性的影响,为蚊虫抗药性生物化学检测方法的推广应用提供依据。方法以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定单个蚊虫NSE活性。结果DDVP抗性品系淡色库蚊NSE活性水平明显高于敏感品系;经完全随机设计的方差分析比较,-20℃冰冻0、7、14、21、28d的淡色库蚊NSE活性A值之间的差别,敏感品系4龄幼虫的F值为0.7642,该品系3日龄雌成虫的F值为0.7452,DDVP抗性品系4龄幼虫的F值为0.1092,该品系3日龄雌成虫的F值为0.1521,P值均>0.05,差异无统计学意义。结论-20℃冰冻28d对淡色库蚊4龄幼虫和3日龄雌成虫体内NSE活性无影响,可在现场采集蚊虫带回实验室集中测定。

　　【摘要】　目的　探讨冰冻储存对淡色库蚊非特异性酯酶（non-specific esterase， NSE）活性的影响，为蚊虫抗药性生物化学检测方法的推广应用提供依据。方法　以β-乙酸萘酯为底物，坚固蓝B盐为显色剂，测定单个蚊虫NSE活性。结果DDVP抗性品系淡色库蚊NSE活性水平明显高于敏感品系；经完全随机设计的方差分析比较，-20 ℃冰冻0、7、14、21、28 d的淡色库蚊NSE活性A值之间的差别，敏感品系4龄幼虫的F值为0.7642，该品系3日龄雌成虫的F值为0.7452，DDVP抗性品系4龄幼虫的F值为0.1092，该品系3日龄雌成虫的F值为0.1521，P值均＞0.05，差异无统计学意义。结论　-20 ℃冰冻28 d对淡色库蚊4龄幼虫和3日龄雌成虫体内NSE活性无影响，可在现场采集蚊虫带回实验室集中测定。

目的 探讨抗DDVP、抗残杀威、抗氯氰菊酯品系淡色库蚊的抗药性生物测定水平与乙酰胆碱酯酶(AcetylchOlinesterase,AChE)活性的相关性。方法 采用WHO生物测试法和微量滴定板法。结果 在43个世代选育过程中,抗DDVP、抗残杀威、抗氯氰菊酯3种抗性品系抗性指数随世代的增加而增高,而AChE活性及敏感性在3种抗性品系中,抗残杀威品系AChE的平均抑制率随着世代的增加抗性增高程度逐渐变低,其次为抗DDVP品系。而抑制率<30%的蚊虫抗性个体频率随着世代的增加抗性增高而增高,以抗残杀威品系最高,其次为抗DDVP品系,呈正相关关系。与生物测试法基本一致。而抗氯氰菊酯品系与敏感品系相类似。结论 AChE活性在淡色库蚊与氨基甲酸酯类及有机磷杀虫剂的生测抗性水平具有相关性,与拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性关系不大。

目的 探讨淡色库蚊残杀威抗性品系对5种化学杀虫剂的抗性发展及交互抗性,为合理使用杀虫剂提供依据。方法 采用WHO标准生物测试法,计算LC50、回归方程及抗性倍数。结果 经过43代的选育,抗残杀威品系的抗性达11.26倍。在21代时,对残杀威、DDVP、氯氰菊酯、三氯杀虫酯、溴氰菊酯的抗性倍数分别为9.54、2.68、7.00、1.74、1.70;到第30代时分别为11.34、2.85、8.07、2.00、1.80;到39代时对残杀威的抗性为11.78倍,对DDVP和氯氰菊酯的抗性分别为3.35和9.71倍。结论 长期使用一种杀虫剂易产生抗性,亦对其他杀虫剂产生交互抗性,用药时应注意种类的选择。

目的 为延缓抗性的发展,测定了淡色库蚊幼虫DDVP抗性品系对常用的几种杀虫剂混用后的敏感性及与增效剂氯化胡椒基丁醚(S₁)、八氯二丙醚(S₂)和增效胺混用的效果。方法 采用WHO生物测试法,计算LC₅₀、增效系数。结果DDVP+三氯杀虫酯、氯氰菊酯+残杀威、氯氰菊酯+DDVP、残杀威+三氯杀虫酯,各组共毒系数分别为180.07～237.50、158.11～198.95、155.22～175.00、120.28～132.12;DDVP+S₂、DDVP+S₁、DDVP+增效胺的增效系数分别为2.96～11.36、1.49～2.18、1.41～1.59。结论 当淡色库蚊对DDVP产生抗药性后,氯氰菊酯或三氯杀虫酯与DDVP或残杀威混用均能取得较好的防制效果,DDVP与增效剂复配亦有增效作用。

目的为延缓蚊虫抗性的发生和发展,更好地选用卫生杀虫剂,控制卫生害虫,测定了山东省部分地区淡色库蚊对常用杀虫剂混用的敏感性。方法采用WHO生物测试法,计算LC₅₀、回归方程、增效系数。结果氯氰菊酯+残杀威、氯氰菊酯+DDVP复配共毒系数分别在125.78～395.21之间、127.37～364.50之间,显示出较好的增效作用。DDVP+残杀威复配效果较差。结论当淡色库蚊产生抗药性后,采用有机磷或氨基甲酸酯类杀虫剂与拟除虫菊酯类混用的方法,能取得较好效果。

目的探讨山东省不同地区、不同时间蚊虫对化学杀虫剂的抗性状况。方法WHO生物测定法、区分剂量法。结果不同地区、不同时间对拟除虫菊酯类杀虫剂抗性普遍较高;对有机磷类,用量大的地区使用频率高时抗性较高;有些地区对氨基甲酸酯类杀虫剂也产生了抗性。对停用多年的DDT有些地区抗性仍较高,对三氯杀虫酯的抗性,个别地区与敏感品系蚊虫相接近。结论蚊虫对不同杀虫剂的抗性,地区间有明显差别,与使用频率高低有关;长期单一用药会引起抗性升高,必须合理使用杀虫剂。

目的:观察表达B.t.icryIVD基因的大肠埃希菌对蚊幼虫的毒效。方法:细菌的诱导表达及蚊虫毒效测试。结果:加入工程菌48h对淡色库蚊和白纹伊蚊均具有明显的杀灭作用,LC₅₀分别为2.38×10⁶、1.6×10⁷个/ml细胞,其中对淡色库蚊的杀灭作用要好于对白纹伊蚊幼虫的杀灭效果。结论:单独表达B.t.icryIVD基因具有杀蚊作用。

目的:观察干燥贮存的基因工程藻对淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法:干燥、贮存和毒性测试。结果:3种转基因工程藻经干燥贮存后仍具有较高杀蚊毒效;但随着贮存时间的延长,其杀灭作用有所下降。3种转基因工程藻之间杀蚊幼效果无明显差异。结论:蓝藻质粒在干燥贮存的工程藻内仍能稳定遗传,因而利于现场推广应用。

目的:探讨简捷灵敏的蚊虫抗药性早期测报技术。方法:以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,用微量滴定板法测定实验室和现场单个淡色库蚊非特异性酯酶活力。结果:实验室5个品系淡色库蚊以抗DDVP品系非特异性酯酶活力水平最高,其次为抗残杀威品系和抗DDVP降解品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近;3个现场淡色库蚊种群对DDVP抗性为4.15～9.36倍,对残杀威抗性为1.02～3.81倍,其非特异性酯酶活力水平均较高。结论:微量滴定板法测定非特异性酯酶能够检测蚊虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性水平。方法简便快速,结果客观准确,可重复性强;可测出抗性频率,早期发现抗性的存在;可测知抗性机制,便于制订克服抗药性的对策。

目的:测定淡色库蚊敏感品系和抗性品系的非特异性酯酶(NSE)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性状况,区分单个蚊虫的抗性情况。方法:滤纸法。结果:敏感品系个体的NSE和AchE在滤纸上显色较浅或不显色,抗性品系个体则显色较深。采用不同浓度杀虫剂对蚊虫AchE活性进行抑制试验,敏感品系个体的AchE随杀虫剂浓度的增加而被抑制(不显色),抗性品系个体则不被抑制(显色明显)。结论:两品系间AchE的含量和活性有所不同。滤纸法可快速地测定淡色库蚊内的NSE和AchE活性,简单易行,可作为一种淡色库蚊抗药性测定方法,便于在现场中推广应用。

目的:评价班氏丝虫特异生物素DNA探针/PCR系统用于丝虫病防治后期蚊媒监测的效果。方法:应用长臂光敏生物素标记的班氏丝虫种特异的DNA片段(490bp)为探针,结合聚合酶链反应技术,对实验室感染蚊虫和现场捕获蚊虫进行检测。结果:该探针只与班氏丝虫感染蚊提取的DNA杂交,不与马来丝虫感染蚊提取的DNA、其他动物丝虫DNA以及正常蚊DNA杂交。同批人工感染班氏微丝蚴蚊虫,人工解剖镜检阳性率为21.28%,探针检测阳性率为30.67%,差异无显著性(P>0.05)。在平均感染度为1.6条幼虫/蚊情况下,50只蚊虫中有1只感染蚊即可被探针检出。在河南省班氏丝虫病流行区自病家和病村其他户分别捕获蚊虫,应用探针每20只为一组进行检测,蚊虫最低阳性率分别为0.75%和0.19%,检测非病村正常蚊均为阴性。结论:该DNA探针/PCR系统的敏感性和特异性均达到实用水平,为丝虫病防治后期的监测增添了一新的有用工具。

目的:了解蚊虫对常用杀虫剂抗药性发展趋势。方法:在济宁市区采集淡色库蚊,采用区分剂量法和WHO浸渍法测定每种杀虫剂致蚊虫的死亡率和半数致死浓度(LC₅₀),并计算抗性指数。结果:淡色库蚊对DDVP和溴氰菊酯抗药性较强,DDVP抗性指数由8.30倍上升到20.63倍,溴氰菊酯波动在13.09～44.21倍之间,对DDT由1.11倍上升到11.53倍,对马拉硫磷由1.76倍上升到6.16倍,氯菊酯在3.04～5.40倍之间。结论:淡色库蚊对常用化学杀虫剂均产生不同程度的抗药性,在现场应用中应科学合理地选用杀虫剂。

目的：检测不同敏感品系（S）蚊虫和室内选育的抗性品系淡色库蚊体内乙酰胆碱酯酶（AchE）活性。方法：微滴定板法。结果：4种S品系蚊虫中，以中华按蚊体内AchE水平最高；3种抗性品系蚊虫中，抗残杀威品系（Rp）的AchE活性＞抗氯氰菊酯品系（Rc）＞抗DDVP品系（Rd），且后者与S品系差异无显著性。蚊虫体内AchE活性随发育而逐步增高。以不同浓度残杀威作抑制剂，测定室内不同品系淡色库蚊个体的AchE活性，表明蚊虫AchE活性的抑制率随抑制浓度的提高而增加，呈正比关系；在0．01mmol／L浓度残杀威的抑制下，AchE的抑制率S品系＞Rc品系＞Rd品系＞Rp品系。结论：3种抗性品系的AchE的敏感性均低于S品系。

目的：探讨淡色库蚊3个抗性品系对5种化学杀虫剂的交互抗性，为合理使用杀虫剂提供依据。方法：采用WHO标准生物测定法。结果：抗DDVP品系达14.47倍的抗性，而对氯氰菊酯、残杀威的交互抗性分别为207.27倍和8.96倍，对溴氰菊酯基本没有交互抗性，对DDT为0.17倍，呈负交互抗性。抗残杀威品系达6.93倍抗性，对氯氰菊酯、DDVP的交互抗性为8.56倍、3.27倍，对DDT基本无交互抗性，对溴氰菊酯呈负交互抗性。抗氯氰菊酯品系达501.11倍的抗性，对溴氰菊酯、DDT的交互抗性为6.10倍及8.55倍，而对DDVP、残杀威基本无明显交互抗性。结论：长期使用一种杀虫剂易产生抗性，亦可能对其他杀虫剂产生交互抗性，用药时应注意种类的选择。

目的：观察温度对蚊虫发育历期的影响及与疾病发生的关系。方法：在实验室不同恒温条件下，观察中华按蚊各虫期发育情况及间日疟原虫在该蚊体内子孢子繁殖时间；用直线回归公式求出各虫期发育起点温度（C值）和有效积温（K值日度）。结果：蚊虫各历期均以25～28℃时发育时间短，繁殖快；蚊虫体内子孢子增殖快，密度高。并结合不同地区气温，预测了各地蚊虫生长繁殖的高峰期为7～9三个月，证实与疟疾流行情况相一致。结论：蚊虫的发育历期随温度升高而缩短；间日疟原虫子孢子在中华按蚊体内增殖，温度以25～28℃最为适宜。

目的：探讨蚊虫抗药性敏感测试方法。方法：采用微板法，对室内常规饲养的敏感品系和室内选育的抗DDVP、抗残杀威品系淡色库蚊非特异性酯酶的活性进行了测定。结果：敏感品系蚊虫OD值≥0．9的占17．16％（35／204条）；＜0．9的占82．84％（169／204条）；抗DDVP品系OD值≥0．9的占83.33％（200／240条）；＜0.9的占16.67％（40／240条）；抗残杀威品系≥0.9的占74.89％（176／235条），＜0．9的占25．11％（59／235条）。结论：敏感品系与抗性品系淡色库蚊的平均OD值存在较大差异。

将转入球形芽孢杆菌毒蛋白基因表达质粒的工程藻Anabaena subtropic（pDc26）大量培养后，应用于山东省平阴县进行现场观察。结果表明：工程藻在9.41×10⁵cells/ml浓度以上时，48h可杀死99～100%蚊幼虫；在9.13×10⁴cells/ml浓度时，4d可杀死99%以上蚊幼虫，连续观察2个多月，工程藻仍有明显杀蚊效果，实验组最多14条/勺幼虫，而对照组210条/勺左右。观察还发现，工程藻对库蚊幼虫杀灭效果最好，其次为伊蚊，但高浓度时，对伊蚊仍有明显杀灭效果；由于按蚊幼虫密度太低，未能观察。此结果比单独使用球形芽孢杆菌杀灭蚊幼虫有明显提高，持续时间也延长，这将为蚊虫的持续控制提供一个新的有力武器。

本文报道捕食性中剑水蚤在实验室及现场条件下，对白纹伊蚊幼虫的防治效果。当地分离的广布中剑水蚤室内对蚊幼虫具有强的捕食能力，1只蚤48h内可吞食56条幼虫；蚊笼模拟试验，中剑水蚤7周内杀灭幼虫种群，9周内成蚊种群消失。现场条件下，中剑水蚤在整个蚊虫季节有效控制蚊幼虫的孳生，与B.T.I合用时取得更显著的防治效果。由于该蚤易于大量培养，花费不多，可在蚊虫孳生地建立自己的种群，长期防治蚊幼虫，因而被认为是一种有前途的蚊虫生物防治物。

苏云金杆菌以色列变种(Bti)广泛应用于现场控制蚊幼虫,取得良好的杀灭效果。但由于现有剂型持效期短,限制了更大规模的应用,也给储存运输带来麻烦。本研究主要在室内评价了不同浓度Bti微胶囊制剂对中华按蚊、淡色库蚊和白纹伊蚊幼虫的效果及持效。结果表明,该种制剂有一定的漂浮性,在水内稳定性较好,具较长的持效期,1.25ppm浓度4周内对白纹伊蚊幼虫仍有较理想的杀灭效果。推荐防治中华按蚊、淡色库蚊和白纹伊蚊的需要剂量分别为0.25、1.25和0.05ppm,每2～3周施药1次。

本文使用5%奋斗呐可湿性粉剂,分别以2.5mga.i/m²、5mga.i/m²、10mga.i/m²、20mga.i/m²和30mga.i/m²五个不同剂量浸泡棉纱,尼龙纱两种不同布质的蚊帐,进行蚊虫防制试验。同等剂量比较,速效和残效尼龙纱较锦质蚊帐毒杀效果为好。各剂量组KT₅₀均在30min以内,24h死亡率达100%;用加热加速试验方法观察,所获指标推算持效可达1年以上。结果还表明,所用剂量尼龙纱蚊帐10mga.i/m²、棉纱蚊帐20mga.i/m²防制效果均较理想。

两种微生物制剂现场防制淡色库蚊幼虫的效果表明,Vectobac G200颗粒剂按0.5g/m²、C₃-41乳剂按1ml/m²施药,可有效地控制淡色库蚊幼虫的孳生,持效均为3天。增加施药剂量可明显增加持效期。上述两种微生物杀虫剂3g/m²或3ml/m²在污水中可分别持效7～9天和13天。