目的 了解贵州省施秉县蜱的双芽巴贝斯虫感染情况。方法 于2021－2022年在贵州省施秉县采集散养黄牛体表寄生蜱，经形态学分类后辅以16S rDNA及细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COX1）基因检测鉴定蜱种类；用梨形虫18S rDNA对样本进行初筛，后用双芽巴贝斯虫顶端膜抗原1（AMA-1）基因进行PCR验证及序列测定，所测序列通过美国国立生物技术信息中心（NCBI）的BLAST进行比对，采用邻接法构建进化树，掌握施秉县蜱携带双芽巴贝斯虫的遗传进化特征。结果 共采集蜱样本615只，分子生物学鉴定有2属4种，分别为微小扇头蜱、镰形扇头蜱、长角血蜱和北岗血蜱；从微小扇头蜱体内检测到双芽巴贝斯虫核酸片段，结果表明，AMA-1基因序列与从菲律宾的牛血及苏丹的小亚璃眼蜱中检出的双芽巴贝斯虫有较近的亲缘关系，18S rDNA基因序列与印度的双芽巴贝斯虫亲缘关系最近。结论 施秉县散养家畜体表寄生蜱体内携带双芽巴贝斯虫的核酸片段，提示施秉县媒介蜱可能存在巴贝斯虫感染。研究结果可为该地区开展蜱传原虫病防治工作提供参考数据。

目的 筛选并鉴定白纹伊蚊全基因组中的胰岛素样肽（insulin-like peptides，ILP）基因，分析其基因结构以及在不同发育时期和不同组织的表达谱。方法 基于埃及伊蚊ILPs家族成员序列，在Vectorbase网站上的白纹伊蚊全基因组数据库做同源搜索，SignalP 6.0 进行信号肽预测，MEGA 11.0软件包对ILPs基因结构特点进行分析，最大似然法构建系统进化树。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测不同发育时期（卵、4龄幼虫、蛹、成蚊），以及吸血前后雌蚊不同组织（头部、脂肪体、中肠、胸部、卵巢）的白纹伊蚊胰岛素样肽（insulin-like peptides of Aedes albopictus，AalbILPs）基因表达变化。采用SPSS 20.0软件做数据统计分析，Tukey’s HSD检验和t检验分析不同发育时期和吸血前后不同组织中AalbILPs基因的表达差异。结果 在白纹伊蚊全基因组中获得7条ILPs开放阅读框序列。7条AalbILPs序列均具有胰岛素超家族的保守特征，由连续的信号肽、B、C和A链组成前肽。其中AalbILP6具有截短的C链和羧基末端延伸，类似脊椎动物的胰岛素生长因子。系统进化树显示，AalbILP1、2、3和5在蚊虫中最为保守，AalbILP6其次，而AalbILP4、7为伊蚊所特有。qRT-PCR结果显示，AalbILP1、2、3和5在不同发育阶段均有表达。AalbILP5在雄蚊中相对表达量为1.358 3±0.576 9，与其他发育阶段和雌蚊相比最高（q_卵=6.572，q_幼虫=5.771，q_蛹=5.409，q_雌蚊=3.115，均P＜0.05）。AalbILP3和4在成蚊头部特异性表达，AalbILP6主要在雌蚊卵巢表达；AalbILP7为假基因，未转录。与未吸血蚊虫相比，吸血诱导AalbILP3和4在雌蚊头部的表达分别上调2.60和1.68倍（t_{AalbILP3-头部}=9.596，P_{AalbILP3-头部}＜0.001；t_{AalbILP4-头部}=4.524，P_{AalbILP4-头部}=0.001）；AalbILP1在头部、脂肪体以及中肠的表达分别上调10.33、6.07和3.79倍（t_头部=4.255，P_头部=0.001；t_脂肪体=4.305，P_脂肪体=0.001；t_中肠=10.480，P_中肠＜0.001），胸部和卵巢的表达分别下调4.24和2.17倍（t_胸部=7.922，P_胸部＜0.001；t_卵巢=3.752，P_卵巢=0.003）；AalbILP6在雌蚊中肠和卵巢的相对表达量分别上调11.91和2.16倍（t_中肠=5.799，P_中肠＜0.001；t_卵巢=9.074，P_卵巢＜0.001）。结论 在白纹伊蚊全基因组中共获得6条ILPs序列，并成功构建其时空表达谱。

目的 了解贵州省不同地理株中华按蚊种群线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（mtDNA-COⅠ）基因序列的多态性，探讨其遗传多样性、遗传分化和种群扩张情况以及遗传距离与地理距离及其相关关系等种群遗传特征。方法 于2017年7月－2018年8月采用灯诱法在贵州省东、西、南、北、中5个方位的12个采样点采集稻田周边的成蚊，经过形态学确认为中华按蚊后，用试剂盒法提取单只蚊虫DNA样本并对mtDNA-COⅠ基因扩增后测序，测序结果用DNAStar 5.0软件进行拼接，在美国国立生物技术信息中心经BLAST比对进行蚊种的分子鉴定，对确认为中华按蚊mtDNA-COⅠ的基因序列使用DnaSP 5.1软件分析其单倍型多样性、核苷酸多样性，并计算各种群间分化系数（Fst）和基因流（Nm）大小，进行中性检验，以明确各种群之间的分化程度和种群扩张情况。使用MEGA 7.1软件计算各种群间和种群内的遗传距离，判断种群之间的遗传变异程度；根据采样点经纬度计算种群间的地理距离，与对应的遗传距离进行相关性检验，以分析两者的相关关系。结果 经分子生物学鉴定，共获得贵州省12个地理株中华按蚊mtDNA-COⅠ基因序列551条，长度为709 bp，其中，碱基（A+T）和（G+C）平均含量分别为68.57%和31.43%，709个位点中保守位点有586个，变异位点有123个，单态位点有189个，简约性信息位点有278个，无插入和缺失位点。551条序列共检出329种单倍型，单倍型多样性指数为0.992，核苷酸多样性为0.015 22以上，12个种群的Fst值在0.000 8～0.420 7，Nm值在0.086 1～75.239 2，中性检验统计值均为负值，种群内遗传距离范围在0.007 1～0.052 9，种群间的遗传距离范围在0.007 9～0.052 2，织金种群和都匀种群内遗传距离较其他种群大；遗传距离和地理距离之间无相关关系，不同种群之间可能存在一定的地理隔离，但种群之间遗传距离的大小与地理距离不相关。结论 贵州省不同地理株中华按蚊种群遗传多样性丰富，在历史上经历了区域性的种群扩张，可能存在一定程度的遗传分化和地理隔离，但在一定范围内种群间也有基因交流，呈现出交流与隔离并存的分布格局。

目的 通过分子生物学技术检测蜱携带立克次体，了解宠物犬体表寄生蜱感染立克次体状况。方法 2021年3－5月从贵阳市乌当区宠物中心宠物犬体表采集蜱样本，进行蜱种鉴定及蜱传立克次体柠檬酸合成酶基因（gltA）和外膜蛋白A基因（ompA）的PCR检测及基因型分析。结果 从宠物犬体表采获蜱133只，通过形态学和蜱16S rRNA扩增，证实均为血红扇头蜱。通过立克次体特异ompA基因扩增、序列测定和遗传进化分析，证实蜱携带病原体为劳氏立克次体（Rickettsia raoultii）。结论 发现宠物犬体表寄生血红扇头蜱，蜱存在劳氏立克次体感染，提示存在立克次体通过宠物犬寄生蜱感染人的风险，建议当地疾控机构对宠物蜱传立克次体的致病性及公共卫生风险做进一步评估。

目的 了解不同饮食对WB株埃及伊蚊雌蚊卵巢、脂肪体和其他剩余组织沃尔巴克氏体（Wolbachia）密度的影响。方法 WB株埃及伊蚊羽化后，分为葡萄糖组、白糖组和血餐组。葡萄糖组和白糖组分别喂食葡萄糖和白糖，血餐组在第3天时喂食血餐2 h，分别收集各处理组4、4.5、5和6 d的蚊虫，解剖获取各蚊虫卵巢、脂肪体和其他剩余组织，分别提取DNA，实时荧光定量PCR法检测各组织沃尔巴克氏体密度。采用SPSS 20.0软件作数据分析，Kruskal-Wallis H检验分析不同饮食条件和不同日龄时蚊虫沃尔巴克氏体密度变化的差异。结果 4.5 d时，在葡萄糖、白糖和血餐条件下，埃及伊蚊雌蚊卵巢沃尔巴克氏体密度分别为2.149、2.773和0.761，血餐组与其他2组密度差异有统计学意义（H=40.754，P<0.001）；而蚊虫脂肪体和其他剩余组织沃尔巴克氏体密度在葡萄糖、白糖和血餐条件下分别为0.859、1.189、1.298和0.505、0.405、1.012，均以血餐组最高（H=1.631，P=0.442；H=6.306，P=0.043）。同一日龄3种饮食条件下，蚊虫卵巢沃尔巴克氏体密度在4、5、6 d时血餐组较低，且在4和6 d时白糖组最高（H=14.335，P=0.001；H=22.049，P<0.001；H=4.963，P=0.084）。蚊虫脂肪体4和6 d时的沃尔巴克氏体密度以及其他剩余组织4、5、6 d的沃尔巴克氏体密度，均为血餐组>白糖组>葡萄糖组（H=7.186，P=0.028；H=10.504，P=0.005；H=16.338，P<0.001；H=14.083，P=0.001；H=4.266，P=0.118）。不同日龄同一饮食条件下，葡萄糖组蚊虫卵巢、脂肪体和其他剩余组织沃尔巴克氏体密度随日龄变化差异无统计学意义（H=4.683，P=0.096；H=2.451，P=0.294；H=0.293，P=0.864）；白糖饮食条件下，蚊虫卵巢和脂肪体沃尔巴克氏体密度随日龄增加有增加趋势，但差异无统计学意义（H=4.731，P=0.094；H=0.390，P=0.823）；血餐条件下，蚊虫卵巢和脂肪体沃尔巴克氏体密度均随日龄先降低后上升（H=20.572，P<0.001；H=9.675，P=0.008）。结论 血餐降低WB株埃及伊蚊生殖组织沃尔巴克氏体密度，可增加非生殖组织内沃尔巴克氏体密度。在实验室条件下，可用白糖饲养蚊虫以增加沃尔巴克氏体密度。