用多引物聚合酶链反应检测鼠疫耶尔森菌

中国媒介生物学及控制杂志

用多引物聚合酶链反应检测鼠疫耶尔森菌

吴明寿1;夏连续2;张志凯2;钟佑宏1;郭英1;海荣2;俞东征2;董兴齐1

1云南省地方病防治所中心实验室大理671000;2中国疾病预防控制中心传染病预防控制所

出版日期:2006-06-20 发布日期:2006-06-20

Detection of Yersina pestis by Polymerase Chain Reaction with Multiplex Primers

WU Ming-shou; XIA Lian-xu; ZHANG Zhi-kai; ZHONG You-hong; GUO Ying; HAI Rong; YU Dong-zheng; DONG Xing-qi

Yunnan Institute for Endemic Disease Control and Prevention, Dali 671000, China

Online:2006-06-20 Published:2006-06-20

摘要/Abstract

摘要： 目的建立多引物检测鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的PCR(M-PCR)方法。方法合成4对引物,分别来源于质粒和染色体DNA上F1、pla、HmsI、nv基因,对164株鼠疫菌进行扩增。结果在164株鼠疫菌中,有152株菌4种基因扩增均阳性,仅云南省12株Hms基因扩增为阴性。结论采用M-PCR方法检测鼠疫菌DNA具有较好的敏感性、特异性和稳定性,其可作为检测与鉴别鼠疫菌和疫情监测方面快速诊断的方法。

关键词: 鼠疫耶尔森菌, 毒力基因, 多引物, 聚合酶链反应

Abstract: Objective To develop a polymerase chain reaction(PCR) method to detect Yersina pestis by multiplex primers(M-PCR).Methods Four pairs of primers,originated from the genes F1(specific capsular antigen fraction 1),pla(palsminogen activator),Hms andInv encoded on the two kinds of 65×10⁶ plasmids and two chromosomal DNA,were designed and 164 strains ofc Y.pestis were amplified with multiplex primers.Results One hundred and fifty-two of 164 strains of(Y.pestis) showed positive in M-PCR.Only 12 strains of them isolated from Yunnan were negative with amplification of the Hms gene.Conclusion M-PCR method showed satisfactory sensitivity,specificity and stability for detecting and identifying Y.pestis DNA and could be used in surveillance and rapid diagnosis for plague.

吴明寿1;夏连续2;张志凯2;钟佑宏1;郭英1;海荣2;俞东征2;董兴齐1. 用多引物聚合酶链反应检测鼠疫耶尔森菌[J]. 中国媒介生物学及控制杂志.

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